Formulação de Anticoagulante ACD-A

O ACD-A (Solução de Ácido Citrato Dextrose A) é um anticoagulante amplamente utilizado na coleta e preservação de sangue, conhecido por sua eficácia em prevenir a coagulação ao quelar íons de cálcio. Esta solução, composta principalmente de ácido cítrico, citrato de sódio e dextrose, desempenha um papel crucial na manutenção da viabilidade e funcionalidade dos componentes sanguíneos coletados. Especificamente, o ACD-A tem benefícios significativos in vivo para a terapia com Plasma Rico em Plaquetas (PRP), pois preserva a integridade e a atividade das plaquetas, melhorando suas propriedades regenerativas quando reintroduzidas no corpo. Isso torna o ACD-A indispensável em tratamentos médicos que utilizam PRP para acelerar a reparação de tecidos e promover a cura.

O que é realmente o ACD-A?

O ACD-A (Solução de Ácido Citrato Dextrose A) é uma solução anticoagulante especializada usada principalmente na coleta e preservação de sangue. A formulação do ACD-A inclui os seguintes componentes:

1. Ácido Cítrico Monoidratado (C₆H₈O₇·H₂O): 8,0 gramas por litro
2. Citrato de Sódio Dihidratado (Na₃C₆H₅O₇·2H₂O): 22,0 gramas por litro
3. Dextrose Monoidratada (D-Glucose, C₆H₁₂O₆·H₂O): 24,5 gramas por litro

Esses ingredientes são dissolvidos em água estéril para compor a solução final. A solução deve ter um pH esperado entre 4,5 e 5,5.

Observe que, se usar ácido cítrico anidro, a concentração será de 7,3g/L de ácido cítrico.

Função e Mecanismo

• Ácido Cítrico e Citrato de Sódio: Esses componentes trabalham juntos para quelar íons de cálcio no sangue. O cálcio é um fator crucial na cascata de coagulação do sangue, e ao se ligar ao cálcio, os citratos efetivamente previnem a coagulação.
• Dextrose: Serve como fonte de energia para as células, particularmente glóbulos vermelhos e plaquetas, ajudando a manter sua viabilidade e funcionalidade durante o armazenamento.

Benefícios In Vivo para PRP (Plasma Rico em Plaquetas)

Quando usado na preparação de PRP (Plasma Rico em Plaquetas), o ACD-A oferece benefícios específicos in vivo:

• Preservação da Função das Plaquetas: O ACD-A ajuda a manter a integridade e as propriedades funcionais das plaquetas, o que é crucial para a eficácia terapêutica do PRP.
• Potencial Regenerativo Aprimorado: Ao preservar a atividade das plaquetas, o ACD-A garante que os fatores de crescimento e outras moléculas bioativas liberadas pelas plaquetas permaneçam potentes, melhorando os processos de reparação de tecidos e cicatrização quando o PRP é administrado aos pacientes.

Uso Prático

Na prática, o ACD-A é misturado ao sangue em uma proporção específica durante a coleta para prevenir a coagulação e manter a qualidade dos componentes sanguíneos coletados. Isso o torna inestimável em várias aplicações médicas, incluindo transfusões de sangue, aférese e terapias PRP, onde a manutenção da integridade funcional das células sanguíneas e das plaquetas é essencial.

As proporções comuns de ACD-A para sangue total na preparação de PRP são entre 1:7 e 1:9.

Formulando uma Solução de ACD-A

Formular o ACD-A (Solução de Ácido Citrato Dextrose A) é um processo meticuloso que requer medição precisa e manuseio cuidadoso de seus componentes para garantir sua eficácia como anticoagulante. É importante notar que um conhecimento prévio de química e procedimentos laboratoriais é essencial para qualquer pessoa que tente formular o ACD-A. Este guia não abrange protocolos básicos de segurança laboratorial ou o conhecimento químico fundamental necessário. Nas seções a seguir, detalharemos o processo passo a passo para formular o ACD-A, destacando os materiais necessários, equipamentos e etapas procedimentais para alcançar uma solução consistente e eficaz. Quer você esteja preparando o ACD-A para uso laboratorial, aplicações clínicas ou propósitos de pesquisa, estas instruções o guiarão pelo processo, garantindo precisão e segurança. No entanto, certifique-se de compreender totalmente os riscos e possuir a expertise apropriada antes de prosseguir.

Materiais e Equipamentos Necessários

1. Luvas Estéreis
   • Uso: Luvas estéreis para manuseio de componentes estéreis.
2. Seringa Luer Lock de 20 mL
   • Uso: Preparar a solução ACD-A misturando água estéril.
3. Agulha 25 x 0,70 mm (22G x 1)
   • Uso: Extrair água estéril de ampolas.
4. Tiras de Teste de pH
   • Uso: Verificar o nível de pH da solução ACD-A preparada.
5. Copo de Vidro de 50 mL
   • Uso: Misturar todos os componentes constituintes.
6. Colher de Chá
   • Uso: Transferir produtos químicos.
7. Balança Analítica
   • Uso: Pesar todos os componentes constituintes.
   • Nota: Requer precisão de 0,001 gramas.
8. Dextrose Monoidratada (D-Glucose, C₆H₁₂O₆·H₂O)
   • Uso: Componente constituinte do ACD-A.
9. Citrato de Sódio Dihidratado (Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)
   • Uso: Componente constituinte do ACD-A.
10. Ácido Cítrico Monoidratado (C₆H₈O₇·H₂O)
    • Uso: Componente constituinte do ACD-A.
11. 40 mL de Água Estéril para Injeção
    • Uso: Preparar a solução ACD-A e preparar o filtro de seringa.
12. Bastão de Vidro
    • Uso: Agitar os constituintes no copo de vidro para obter uma mistura homogênea.
13. Filtro de Seringa Estéril de 30 mm, Membrana PES, 0,22 Microns
    • Uso: Filtrar e esterilizar a solução ACD-A antes de adicioná-la ao frasco estéril de 30 mL.
    • Nota: 0,22 microns é suficiente para remover todas as citotoxinas, endotoxinas e pirógenos. A membrana de polietersulfona foi escolhida especificamente por ser segura para uso in vivo.
14. Agulha 25 x 0,70 mm (22G x 1)
    • Uso: Encher o frasco de ACD-A com a solução ACD-A esterilizada.
15. Lenço Estéril
    • Uso: Limpar o tampão de borracha do frasco de ACD-A antes de adicionar a solução.
16. Frasco de Armazenamento de ACD-A, 30 mL
    • Uso: Armazenar a solução anticoagulante ACD-A.
    • Nota: O frasco deve ser esterilizado e livre de citotoxinas, endotoxinas e pirógenos. Use uma autoclave.

Assista ao Vídeo de Instrução

Neste vídeo, o processo de formulação do ACD-A passo a passo é revelado. Assistir a este vídeo lhe dará uma compreensão visual de cada etapa, garantindo que você possa acompanhar com facilidade.

Instruções

1. Pese 0,660 gramas de Citrato de Sódio Dihidratado, e adicione ao copo de vidro.
2. Pese 0,240 gramas de Ácido Cítrico Monoidratado, e adicione ao copo de vidro.
3. Pese 0,735 gramas de Dextrose Monoidratada, e adicione ao copo de vidro.
4. Prepare a seringa de 20 mL acionando o êmbolo algumas vezes. Isso ajudará a soltar o êmbolo.
5. Use a agulha 22G para retirar 30 mL de água estéril das ampolas e adicione essa água ao copo de vidro.
   • Nota: A água estéril é preferida por ser livre de citotoxinas, endotoxinas e pirógenos que poderiam causar uma reação adversa para uso in vivo.
6. Após adicionar a água, mexa bem a mistura até obter uma solução homogênea. Alguns cristais permanecerão no fundo e podem ser esmagados com a extremidade da haste de vidro.
7. Use um medidor de pH para medir o pH da solução. Ajuste o pH para entre 4,5 e 5,5 usando pequenas quantidades de solução de ácido cítrico ou citrato de sódio conforme necessário. No entanto, se as proporções de concentração foram seguidas, a solução já deve estar ajustada.
8. Use o lenço estéril para higienizar o tampão de borracha do frasco de armazenamento de 30 mL.
9. Prepare o filtro de seringa anexando-o a uma agulha estéril 22G, tendo cuidado para não contaminar o lado estéril do filtro.
10. Usando a ampola restante de 10 mL de água estéril, puxe a água para dentro de uma seringa de 20 mL. Use essa água para preparar o filtro estéril empurrando-a através do filtro para um recipiente de descarte. Este passo garante que quaisquer fibras soltas ou partículas no lado estéril do filtro sejam eliminadas e não contaminem a solução final.
11. Tampe a montagem da agulha/filtro estéril e desconecte da seringa. Reserve.
12. Usando a seringa de 20 mL, aspire a solução de ACD-A do copo de vidro. Note que 10 mL da solução permanecerão no copo e precisarão ser processados em uma etapa subsequente.
13. Anexe a montagem da agulha/filtro estéril à seringa de 20 mL e proceda a preencher o frasco de 30 mL com a solução de ACD-A.
14. Uma vez que a seringa de 20 mL esteja vazia, desconecte a seringa da montagem da agulha/filtro, deixando a montagem no tampão de borracha do frasco.
15. Aspire a solução de ACD-A restante do copo de vidro usando a seringa. Reanexe a seringa à montagem da agulha/filtro sem removê-la do tampão de borracha e preencha o frasco com o restante da solução.
16. Limpe o frasco e rotule-o com o conteúdo e a data de formulação.

Verificações Finais e Armazenamento

Certifique-se de que a solução esteja clara e livre de partículas. Recomenda-se que a solução seja armazenada em temperatura ambiente, 24 °C (75 °F); no entanto, a solução pode ser armazenada entre 15 °C (59 °F) e 30 °C (86 °F). Proteja da congelação e minimize a exposição ao calor excessivo. O ACD-A deve ser utilizado dentro de trinta dias após a formulação.

A limitação na duração do armazenamento é principalmente devido a preocupações com a estabilidade e esterilidade da solução ao longo do tempo. Componentes como ácido cítrico, citrato de sódio e dextrose podem degradar ou reagir ao longo de períodos prolongados, potencialmente reduzindo a eficácia da solução como anticoagulante. Além disso, manter um ambiente estéril é crucial para prevenir a contaminação microbiana, o que é mais difícil de garantir em períodos de armazenamento mais longos.

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